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数字PCR技术平台介绍

背景介绍


数字PCR(Digital PCR-dPCR)技术是一种新的DNA检测和绝对定量方法。与传统定量PCR(qPCR)技术不同,数字PCR是将传统PCR的指数倍信号转换成线性的数字信号,通过特定的仪器读值,并利用统计学方法来对PCR产物进行分析。

目前数字PCR技术包含微滴式和微孔式检测平台,原理都是将含有核酸分子的反应体系分成成千上万个单分子体系后,将单分子模板进行PCR扩增和核酸拷贝数精确定量。


数字PCR的研究进展


美国哈佛大学医学院Dana-Farber癌症研究所的Adrian G. Sacher团队开展了一项前瞻性验证研究,旨在分析血浆微滴式PCR(Droplet Digital PCR , ddPCR)用于快速检测肺癌患者中EGFR和KRAS基因突变,以及EGFR T790M耐药突变的可行性。研究结果2016年4月7日在线发表于JAMA Oncology杂志。

其研究结果表明:液体活检技术的报告获取时长远低于传统组织活检技术;液体活检检测结果与传统的组织活检一致性较高;液体活检能更好地反应肿瘤组织中不同突变的类型;液体活检取样简单,可以对患者进行实时监测,对患者治疗后新发突变及时检测。


数字PCR的应用


数字PCR的应用范围主要包括高精度拷贝数变异检测,稀有突变检测以及二代测序结果的验证。临床意义主要为:耐药突变检测、治疗靶点突变检测、疾病早筛以及药效评估。


数字PCR的优势


· 高灵敏度—数字PCR技术是目前灵敏度最高的突变检测方法之一(如图1所示)。


图1. 几种技术平台检测灵敏度的比较


· 精准—数字PCR技术可精确定量基因突变丰度,高精度检测拷贝数变异。

· 无创—组织或者血液样本均可进行检测。对于无法获取组织的患者,可通过无创外周血检测精确判断每名患者EGFR- T790M的突变状况。便于通过数字PCR多次检测来动态监测肿瘤的进展动态,及时发现疾病进展,调整靶向治疗方案。

· 检测全面—由于肿瘤异质性广泛存在,利用数字PCR进行液态活检能够对肿瘤内的多个部位在多个时间点进行检测,就有可能鉴定出突变导致的肿瘤异质性,从而为个体化治疗提供重要线索。

· 检测周期短—相对于组织活检技术和NGS技术,数字PCR技术的检测周期更短。


泛生子公司在数字PCR方面的战略合作




2016年6月28日,北京泛生子基因科技有限公司携手美国赛默飞世尔科技,共同签署战略合作协议,共建精准医学联合研发中心。


泛生子公司在数字PCR方面的产品


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